產品介紹
【適用范圍】
適用于培養各種內皮細胞,如人腎小球內皮細胞(HRGEC),人臍靜脈內皮細胞(HUVEC),人視網膜微血管內皮細胞(HRVEC),人腦微血管內皮細胞(HBMEC),小鼠小腸血管內皮細胞(C166)等。
【使用方法】
培養基從冰凍區中取出后(切勿直接將產品從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀),置于2℃~8℃中使之融化,解凍過程中間歇地輕輕搖晃均勻,待全部溶解后再分裝或直接使用。融解后的培養基,建議其置于4℃冰箱存放并于1-2周內用完。
【有效日期】
詳見產品標簽
【儲存條件及保質期】
應貯存在-10℃~-20℃,避免反復凍融;
有效期為24個月。
【操作步驟】
貼壁細胞傳代培養:
1. 提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內。
2. 吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞。
3. 加入適量酶,使酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去酶。
4. 加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡。
5. 將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
【聲明】
僅用于科研使用,不能用于臨床診斷和治療。